Identyfikacja nieuczęszczanych Bacillus z choroby Whipplea

W 1907 roku George Whipple zgłosił dotychczas nieopisaną chorobę 36-letniemu misjonarzowi medycznemu z migrującym zapaleniem wielostawowym, kaszlem, biegunką, złym wchłanianiem, utratą wagi i limfadenopatią krezkową.1 Nazwał tę chorobę lipodystrofią jelitową . Obecnie nazywamy to chorobą Whipple a, chorobą ogólnoustrojową, głównie białych mężczyzn w średnim wieku, charakteryzujących się bólem stawów, biegunką, bólem brzucha i utratą masy ciała. Inne powszechne ustalenia obejmują powiększenie węzłów chłonnych, gorączkę i zwiększoną pigmentację skóry. choroba zazwyczaj obejmuje przewód żołądkowo-jelitowy, krezkę, serce i centralny układ nerwowy; może jednak wpływać na prawie każdy inny układ narządów. Diagnozę ustala się, gdy badanie mikroskopowe jelita cienkiego wykazuje infiltrację blaszki właściwej przez duże makrofagi, które zawierają inkluzji odpornych na diastazę, które są pozytywne w przypadku barwienia metodą periodycznego acidSchiff (PAS). Podobne makrofagi PAS-dodatnie można znaleźć w innych zaangażowanych tkankach. W swoim oryginalnym raporcie Whipple zanotował wielką liczbę organizmów w kształcie pręcika (.) W zabarwionych srebrem odcinkach węzła chłonnego i spekulował, że ten organizm może być czynnikiem wywołującym chorobę.1 Dopiero w 1961 r. struktury w kształcie prętów zostały zidentyfikowane za pomocą mikroskopii elektronowej jako pałeczki.4, 5 Następne badania wykazały, że te prątki mają unikalną strukturę ściany komórkowej i znajdują się w lokalizacjach pozakomórkowych, jak również w makrofagach, gdzie wydają się one przechodzić różne stopnie degradacja 6, 7 Bakterie te i pozostałości ich ścian odpowiadają materiałowi dodatniemu na obecność PAS w zabarwionych tkankach. 4, 5 Ich niezwykły i jednolity wygląd sugeruje, że choroba jest spowodowana przez pojedynczy organizm.2
Nikt, w tym Whipple, nie rozmnażał się z powodzeniem u bakterii tej choroby, pomimo licznych prób. Tożsamość tego niezwykłego organizmu pozostaje jedną z najbardziej uporczywych tajemnic mikrobiologii. Opracowaliśmy technikę identyfikacji patogenów bakteryjnych, która nie polega na ich hodowli i wykorzystaliśmy ją do identyfikacji czynnika angiomatozy pęcherza. Ta technika opiera się na amplifikacji rybosomalnego RNA 16S (dawniej eubakteryjnego9) ( rRNA) bezpośrednio z zainfekowanej tkanki.
Gen, który koduje małą podjednostkę rRNA (16S lub podobną do 16S), gromadzi przypadkowe mutacje w czasie. Ze względu na ograniczenia strukturalne sekwencja rRNA 16S mutuje z szybkością, która czyni ją użyteczną jako zegar ewolucyjny. 10 Na przykład odległość ewolucyjną od jednego organizmu do innego można obliczyć na podstawie liczby różnic nukleotydowych między ich odpowiednimi sekwencjami rRNA 16S. Ponieważ części wszystkich genów rRNA 16S są wysoce konserwatywne, geny te można amplifikować z niescharakteryzowanych organizmów za pomocą starterów o szerokim zakresie stosowanych w reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR). Z sekwencji zamplifikowanych produktów można ustalić relacje filogenetyczne. To podejście zastosowano do choroby Whipple a we wstępnym badaniu11, które opisuje częściową (<50 procent) bakteryjną sekwencję 16S rRNA w jednej próbce od pojedynczego pacjenta z zaburzeniem.
W tym badaniu ustaliliśmy około 90 procent sekwencji genu rSNA 16S bakterii Bacillus związanych z chorobą Whipple a
[więcej w: olej lniany w kapsułkach, aldosteronizm, dawca pamięci online cda ]