Peptyd albuminowy jako potencjalny spust insulino-zależnej cukrzycy cd

Przeciwciała IgG wobec kazeiny (Sigma) i .-laktoglobuliny (Sigma) otrzymane z mleka krowiego mierzono powleczonymi mikrosferami, jak opisano dla pomiaru przeciwciał BSA. Peptyd ABBOS i homologiczny region szczurzej albuminy surowicy (peptyd ABRAS) zsyntetyzowano z C-końcową resztą cysteiny nieobecną w naturalnej sekwencji, do biotynylacji i wiązania z mikrosferami powleczonymi streptawidyną. 26 Dwadzieścia mikrolitrów (0,5% wag./wag.) vol) mikrosfer skoniugowanych z ABBOS lub ABRAS zmieszano z 3 .l surowicy od pacjentów lub zdrowych osobników w końcowej objętości odpowiednio 0,3 ml lub 3 ml. Po inkubacji w 4 ° C przez 15 minut, mieszaniny odwirowano i 20 .l supernatantu użyto do pomiaru resztkowych przeciwciał anty-BSA. Badania ekspresji białek
Białka błon komórkowych pochodzące ze szczurzych komórek insulinoma inkubowanych z interferonem gamma i ekstraktami tkankowymi szczurów, którym podawano ciągłe wlewy interferonu gamma przez tydzień, poddano elektroforezie w żelu poliakryloamidowym z dodecylosiarczanem sodu, przeniesiono na membrany nitrocelulozowe i inkubowano z poliklonalnym szczurzym przeciwciało. Surowica odpornościowa ABBOS.14 Bloty opracowano z użyciem antygenu IgG skoniugowanego z fosfatazą alkaliczną i zeskanowano za pomocą przyrządu Apple OneScan.
Analiza statystyczna
Stężenia przeciwciał wyrażono w jednostkach kilofluorescencji na mikrolitr w stosunku do standardowej puli surowic. Wyniki analizowano za pomocą testu chi-kwadrat, parametrycznej jednostronnej analizy wariancji oraz testu t-Studenta z niesparowanym t dla wartości normalnie rozłożonych. Rozkład stężeń anty-BSA był prawidłowy dla każdego izotypu. W przypadku rozkładu skośnego użyto testu U Manna-Whitneya i testu rangowej korelacji Spearmana. Stężenia przeciwciała anty-BSA po czasie diagnozy były oceniane przez sparowane t-testy.
Wyniki
Przeciwciała anty-BSA
Rycina 1. Rycina 1. Stężenia w surowicy przeciwciała anty-BSA IgG u 142 dzieci w chwili rozpoznania cukrzycy zależnej od insuliny (paski wysklepione) i 79 normalnych dzieci (pręty stałe). Rozkład stężeń przeciwciał anty-BSA IgM i IgA przedstawiono w dolnych panelach po normalizacji przez wygładzenie.
Tabela 1. Tabela 1. Stężenia przeciwciał przeciw krowie – mleko w momencie rozpoznania u dzieci z cukrzycą zależną od insuliny i prawidłowymi dziećmi. * Tabela 2. Tabela 2. Odsetek pacjentów z podwyższonymi stężeniami surowicy przeciwciał anty-BSA . Stężenia przeciwciał anty-BSA IgG w surowicy u pacjentów z cukrzycą były znacznie wyższe niż u zdrowych dzieci (ryc. 1), średnie stężenie było prawie siedmiokrotnie wyższe (p <0,001) (tabela 1). Wśród pacjentów z cukrzycą stężenia były niższe u chłopców niż u dziewcząt (P <0,02). Zgodnie z naszą definicją, wszystkie dzieci z cukrzycą miały podwyższone stężenia anty-BSA IgG, podczas gdy tylko dwa prawidłowe dzieci miały podwyższone wartości (p <0,001) (tabela 2). Podwyższone stężenia IgG anty-BSA w surowicy u pacjentów z cukrzycą nie odzwierciedlały ogólnych odpowiedzi immunologicznych przeciwko antygenom żywieniowym, ponieważ pacjenci i normalni dzieci mieli podobne stężenia przeciwciał IgG przeciwko kazeinie białka mleka krowiego i .-laktoglobuliny (tabela 1).
Średnie stężenie przeciwciał przeciwko BSA w surowicy było wyższe u pacjentów z cukrzycą niż u dzieci zdrowych (P <0,001) (tabela 1), ale wartości się pokrywały (ryc. [hasła pokrewne: zapłodnienie in vitro cena, bobotic forte, maść ichtiolowa na trądzik ]